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大阪府道801号大阪吹田自転車道線（おおさかふどう801ごうおおさかすいたじてんしゃどうせん）は、大阪府大阪市北区の中之島公園から吹田市の万博記念公園に至る、自転車・歩行者専用の一般府道である。

コースの概要

鉾流橋南詰から中之島公園に入り、堂島川左岸を進む。天神橋で堂島川を渡り、同橋北詰を右折後すぐ南天満公園に入り、大川右岸を進む。天満橋を潜ると桜之宮公園に入る。

川崎橋で大川を渡ると都島区に入り、大川左岸を進む。春風橋で城北川を渡り、毛馬橋を潜ると蕪村公園に入る。

蕪村公園を過ぎて毛馬閘門に至ると、ここから淀川河川公園に入り、淀川左岸の堤防天端を進む。おおさか東線淀川橋梁（通称：赤川鉄橋）を潜ると旭区に入り、しばらく進むと守口市に入る。

鳥飼大橋から大阪府道2号大阪中央環状線および大阪モノレール本線に沿って北へ進む。鳥飼大橋で淀川を渡ると摂津市に入り、摂津駅を過ぎてしばらく進むと茨木市に入る。宇野辺駅を過ぎると吹田市に入り、万博記念公園に至る。

鉾流橋南詰で、歩行者・自転車専用道路の中之島遊歩道（中之島プロムナード）が、中之島六丁目の中之島センタービル・上船津橋付近まで設けられている。

川崎橋南詰に近接する備前島地下道で京阪本線を潜ると、自転車・歩道者専用橋である大坂橋を経由して大阪城公園へ行くことが出来る（ただし、備前島地下道は自転車を降りる必要がある。自転車利用は東へ約250mの迂回が求められる）。

赤川鉄橋付近で、大阪府道803号旭西淀川自転車道線（通称：なにわ自転車道）と合流していたが、2019年（平成31年）春のおおさか東線（新大阪駅 - 放出駅間）の開業に向けて、赤川鉄橋を含む城東貨物線は複線化されることとなり、2013年（平成25年）10月31日限りで歩道部分は閉鎖された。

鳥飼大橋南詰付近で、大阪府道804号北河内自転車道線（通称：北河内サイクルライン）と合流する。

桜之宮公園付近ではホームレスの人たちがブルーシートや段ボール等を資材としてテント・小屋掛けをしたりしている。

難波橋、天神橋、天満橋、川崎橋、桜宮橋、源八橋、大阪環状線淀川橋梁、都島橋、飛翔橋、毛馬橋を潜る箇所は、高さが低いので頭上に注意する必要がある。

大阪府道2号大阪中央環状線および大阪モノレール本線沿いには、信号・跨線橋などが多数ある。

阪急京都本線の南茨木駅付近とJR京都線を横切る箇所（立命館大学大阪いばらきキャンパス付近）では跨線橋上を走行する必要がある。

大阪市北区より吹田市までの通過地点順に並べている。